Dottorato in FISIOPATOLOGIA ED IMAGING CARDIO-TORACO-VASCOLARE

Titolo della tesi: Impatto del DNA tumorale circolante e DNA libero circolante su diagnosi precoce di tumore al polmone in pazienti con riscontro radiologico di ground glass opacity (GGO)

Scopo dello studio Le opacità polmonari a vetro smerigliato (GGO) sono sempre più frequentemente riscontrate nella pratica clinica quotidiana grazie al continuo miglioramento degli strumenti radiologici. Nella maggior parte dei casi si tratta di entità infiammatorie benigne e transitorie, ma fino al 37% di questi è associato a carcinoma polmonare in stadio iniziale. Il follow-up radiologico a lungo termine è ad oggi il gold standard per una diagnosi differenziale. Lo scopo di questo studio pilota è una valutazione preliminare del ruolo diagnostico del DNA libero circolante (cfDNA) e del DNA tumorale circolante (ctDNA) nel sangue periferico di pazienti con riscontro radiologico di GGO. Materiali e metodi Per lo studio pilota, sono stati arruolati 10 pazienti consecutivi (M:F=1:1, età 68,1±10,8 anni) con primo riscontro di GGO alla TC. Al momento della prima visita, 20 mL di sangue venoso periferico sono stati prelevati e il plasma è stato conservato a -80°C dopo centrifugazione. Il cfDNA estratto dal plasma è stato quantificato utilizzando Easy PGX. Per la rilevazione del ctDNA è stato utilizzato un approccio mirato, utilizzando il pannello Myriapod® NGS Cancer Panel DNA. I pazienti sono stati sottoposti a follow-up radiologico o prelievo istologico secondo le linee guida internazionali. La diagnosi radiologica/istologica è stata confrontata con i dati per valutare un possibile ruolo diagnostico del cDNA nelle GGO maligne. Inoltre, i risultati del ctDNA sono stati confrontati con i campioni istologici per valutare una possibile correlazione con le mutazioni geniche. Al termine dello studio pilota, il periodo di reclutamento è stato riaperto per ulteriori valutazioni. Risultati Sei pazienti hanno ricevuto una diagnosi istologica di GGO maligna, mentre 4 pazienti hanno ricevuto una diagnosi radiologica/istologica di nodulo infiammatorio. Le GGO pure erano più frequentemente benigne rispetto alle GGO miste (valore p=0,0228). La quantità media di cfDNA era di 1,23±1,68 ng/μL per paziente. I pazienti con GGO maligna hanno mostrato una quantità inferiore di cfDNA nel sangue periferico rispetto ai pazienti con GGO infiammatoria (0,613 vs 2,156 ng/μL; p=0,031). Nove pazienti hanno presentato risultati affidabili nell'analisi del ctDNA. Tra i 17 geni valutati, i più frequentemente mutati sono stati HRAS e KIT (40%), seguiti da NRAS (30%), IDH-2 (20%), RET (20%) e PIK3CA (20%). Tuttavia, non sono stati trovati geni concordanti tra ctDNA e analisi tissutale. Considerando questi risultati, la seconda fase dello studio si è concentrata sulla valutazione del cfDNA. La coorte finale era composta da 27 pazienti (M:F 0,59:1, età 67,9±11,3 anni). Sedici (59,3%) avevano una diagnosi di adenocarcinoma, mentre 11 (40,7%) avevano una diagnosi di nodulo benigno/infiammatorio. I pazienti con patologia maligna hanno mostrato un cfDNA medio inferiore nel sangue periferico (1,19 ± 0,68 vs 1,41 ± 1,57), ma senza differenze statistiche tra i gruppi (p-value 0,771). Conclusioni Dalla nostra analisi preliminare, il cancro polmonare in fase molto precoce non rilascia quantità rilevanti di ctDNA nel sangue periferico. Pertanto, al momento, la rilevazione del ctDNA non sembra avere un ruolo nella diagnosi precoce del cancro polmonare nei pazienti con GGO. Tuttavia, nel nostro campione, le GGO maligne hanno mostrato una quantità inferiore di cfDNA rispetto ai pazienti con malattia infiammatoria. Questo aspetto potrebbe aprire nuove linee di ricerca in futuro.