Dottorato in NEUROSCIENZE CLINICO-SPERIMENTALI E PSICHIATRIA

Titolo della tesi: Enhancing Natural Killer cell cytotoxicity to counteract Glioblastoma growth

Il glioblastoma (GBM) è il tumore primario cerebrale più aggressivo negli adulti, caratterizzato da rapida proliferazione, ampia capacità d'infiltrazione e marcata resistenza terapeutica. Nonostante i progressi nei trattamenti chirurgici, chemioterapici e radioterapici, la prognosi dei pazienti rimane infausta, con una sopravvivenza media di circa 15 mesi. Un ostacolo fondamentale all’efficacia terapeutica è rappresentato dal microambiente tumorale (TME) fortemente immunosoppressivo, che limita l’attività sia dell’immunità innata che di quella adattativa. In particolare, le cellule Natural Killer (NK), effettori chiave dell’immunità innata, mostrano una citotossicità compromessa nel GBM a causa della sovraregolazione di checkpoint immunitari inibitori quali NKG2A e PD-1. Ripristinare la funzionalità delle cellule NK rappresenta quindi una strategia terapeutica promettente per riattivare la risposta antitumorale. In questo lavoro, abbiamo valutato se il silenziamento dell’mRNA di nkg2a e pd-1 tramite small interfering RNA (siRNA) veicolati da dendrimeri anfipatici (AD) potesse potenziare la citotossicità delle cellule NK contro il GBM. In vitro, il trattamento con D-siRNA ha ridotto l’espressione di nkg2a e pd-1 nelle cellule NK, determinando un aumento significativo del marcatore di attivazione CD107 e della loro attività citotossica. Per amplificare l’effetto dei D-siRNA in vivo in modelli murini ortotopici di GBM, abbiamo co-somministrato i complessi D-siRNA con il peptide iRGD, che aumenta la permeabilità della barriera ematoencefalica ai costrutti. Questo co-trattamento ha permesso di osservare un efficace silenziamento genico e una marcata riduzione del volume tumorale. Inoltre, il trattamento con questi nanosistemi ha portato a una modulazione del TME, riducendo il reclutamento di cellule mieloidi senza alterarne il fenotipo e attenuando l’astrogliosi. Complessivamente, questi risultati dimostrano che il silenziamento di nkg2a e pd-1 potenzia la citotossicità delle cellule NK e rimodella il microambiente del GBM verso uno stato meno immunosoppressivo. L’integrazione tra silenziamento genico e sistemi nanotecnologici di delivery rappresenta una piattaforma promettente per potenziare l’immunoterapia basata sul blocco dei checkpoint immunitari nel GBM.