Titolo della tesi: Study of the alterations of DNA replication in terminally differentiated muscle cells.
Il differenziamento terminale è caratterizzato dall’acquisizione di funzioni specializzate e da un arresto permanente del ciclo cellulare, una condizione nota come stato postmitotico. I meccanismi molecolari che inducono e mantengono questo stato sono tuttora poco conosciuti.
I miotubi scheletrici, un modello classico di differenziamento terminale, possono essere indotti sperimentalmente a rientrare nel ciclo cellulare; tuttavia, essi non riescono a completare la replicazione del DNA e vanno incontro a morte cellulare. In questo lavoro abbiamo indagato le cause di tale difetto replicativo. Nuclei di mioblasti (MB) proliferanti e di miotubi (MT) differenziati sono stati incubati in un estratto replicativo di uova di Xenopus laevis, che fornisce la dotazione biochimica completa per la replicazione del DNA. Anche in questo contesto permissivo, i nuclei di MT hanno duplicato solo circa metà del loro genoma, suggerendo la presenza di ostacoli strutturali a livello della cromatina. La disorganizzazione dell’architettura cromatinica mediante trattamento salino non ha ripristinato un’efficiente replicazione, indicando che il blocco replicativo è intrinseco alla struttura fondamentale della cromatina differenziata.